融合蛋白CXCL10-loop3- EGF的可溶性表达及其抗肿瘤效应研究

• 作者: 何小帆 傅鹰 孟哲峰 徐巍 朱敏 沈波
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CXCL10-loop3-EGF融合蛋白 可溶性表达 抗肿瘤效应
• 年，卷（期）: 2009,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2376-2380
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 4357字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2009.12.018

摘要

目的:构建重组趋化因子CXCL10及表皮生长因子受体干扰序列融合蛋白(CXCL10-loop3-EGF),验证其靶向性抗肿瘤效应及抑制血管形成活性.方法: 运用RT-PCR从经IFN-γ刺激活化的PBMC中扩增人CXCL10基因,运用重叠延伸PCR法扩增CXCL10-loop3-EGF融合基因,并将其与载体pTG19-T连接、转化大肠杆菌DH5α、筛选阳性克隆,CXCL10-loop3-EGF融合基因与载体pET32a(+)连接、转化大肠杆菌Origami B(DE3),诱导可溶性表达重组his-CXCL10- loop3-EGF融合蛋白,并经镍柱亲和层析、酶切、超滤及透析等方法获得纯化的重组CXCL10- loop3-EGF融合蛋白.通过Transwell细胞趋化实验及HUVEC血管形成抑制实验验证此融合蛋白的抗肿瘤效应.结果: SDS-PAGE和Western blotting证实CXCL10- loop3-EGF融合蛋白构建成功,纯化后的融合蛋白具有显著的趋化活化PBMC活性及抑制HUVEC血管形成活性.结论: 成功构建融合蛋白CXCL10- loop3-EGF,该蛋白具有较好的靶向性抗肿瘤活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱敏	浙江省台州医院检验科	29	112	6.0	9.0
2	沈波	浙江省台州医院检验科	35	223	7.0	14.0
3	傅鹰	浙江省台州医院检验科	6	15	3.0	3.0
4	何小帆	浙江省台州医院检验科	14	24	3.0	4.0
5	孟哲峰	复旦大学上海医学院医学分子病毒学重点实验室	6	9	2.0	3.0
6	徐巍	浙江省台州医院检验科	10	16	2.0	4.0