MEF2A第11号外显子CAG三联核苷酸重复序列的改变与其转录激活活性的相关性

• 作者: 周晓阳 张铁梅 戴大鹏 蔡剑平 郑君德
• 来源期刊: 医学研究杂志
• 关键词: MEF2A 三联核苷酸重复序列 HRC 增强子 转录激活作用
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 论 著
• 页码范围: 22-25
• 页数: 4页
• 字数: 2999字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-548X.2009.04.009

摘要

目的 探讨MEF2A第11号外显子CAG三联核苷酸重复序列的改变与其转录激活活性的相关性.方法 PCR法扩增富含组氨酸钙结合蛋白(histidine-rich calcium-binding protein,HRC)基因启动子/增强子序列,插入报告载体pGL3-Basic中,生成pGL3-HRC enhancer质粒,该质粒与全长野生型MEF2A cDNA表达质粒pCDNA-MEFcDNA,或含4～15个CAG的变异型MEF2A cDNA表达质粒pCDNA-MEFcDNA-CAGr,以及内参质粒pRL-TK,用脂质体转染法共转染于293T细胞,Westernblot检测MEF2A蛋白的表达,双荧光素酶检测系统测定报告分子的表达.结果 成功构建了MEF2A蛋白体外转录激活活性检测系统;所构建的含4～15个CAG序列的MEF2A变异蛋白,与含11个CAG序列的野生型MEF2A蛋白之间其转录激活活性没有显著性差异.结论 目前已发现的MEF2A第11号外显子CAG重复数目的 改变不会影响MEF2A蛋白的转录激活活性.