一株分泌抗猪γ-干扰素单克隆抗体的杂交瘤细胞的鉴定

• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪γ-干扰素 融合蛋白 单克隆抗体 制备 鉴定
• 年，卷（期）: 2009,（27）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 12955-12956,12983
• 页数: 3页
• 分类号: S852
• 字数: 3362字
• 语种: 中文

摘要

[目的]应用杂交瘤技术获得稳定分泌抗猪γ-干扰素单克隆抗体的杂交瘤细胞株.[方法]先将原核表达产物His-PoIFN-γ免疫BALB/c小鼠4次,然后进行细胞融合,再以纯化的GST-PoIFN-γ作为包被抗原,用间接ELISA筛选阳性杂交瘤无性系,最终获得能稳定分泌抗猪IFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株,对其进行间接ELISA和Western blot检测.[结果]试验获得1株能稳定分泌抗猪IFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株,被命名为B3株,经间接ELISA和Western blot检测,该株分泌的抗体能与融合蛋白His-PoIFN-γ和GST-PoIFN-γ发生特异性反应,而与其他表达鸡γ-干扰素、His和GST蛋白等的重组质粒均不发生反应.B3株分泌的抗体小鼠腹水的ELISA效价达到1∶160 000,抗体亚型为IgG1型,且轻链为κ链.[结论]该研究为建立猪γ-干扰素检测方法,研究机体的免疫状态及免疫机制提供了技术基础.