反义RNA逆转耐药肝癌基因工程细胞株多药耐药性的实验研究

• 作者: 倪建彬 冯春红 叶田 夏先明 张孟瑜 徐松波 李德华 李波 罗亮 贺凯 陈星 陈永兵
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 多药耐药性 多药耐药基因 肝癌细胞株 工程细胞株
• 年，卷（期）: 2009,（19）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2907-2910,2914
• 页数: 5页
• 分类号: R735.7
• 字数: 3512字
• 语种: 中文

摘要

目的 通过重组腺病毒表达出mdr1基因的反义RNA,观察反义RNA对人肝癌基因工程细胞株HepG2/K多药耐药性的逆转效应.方法 利用真核表达载体构建可以稳定表达mdr1基因和P糖蛋白的肝癌基因工程细胞株HepG2/K,通过腺病毒载体AdEasy系统生成重组腺病毒pAdEasy-GFP-ASmdr1,将此病毒感染HepG2/K,用KT-PCR检测mdr1 mRNA的表达强度,流式细胞仪检测细胞膜p-糖蛋白的表达和柔红霉素的蓄积率,HepG2/K细胞对阿霉素的耐药性用MTT法检测.结果 HepG2/R细胞感染重组腺病毒后,RT-PCK检测表明mdr1 mRNA表达下降,流式细胞仪检测证实P-gP表达下降和柔红霉素的蓄积率增加,MTT法表明HepG2/K细胞对阿霉素的IC_(50)从25μg/mL下降到3μg/mL.结论 反义RNA通过抑制mdr1 mRNA和P-gp的表达.