人乳铁蛋白基因山羊乳腺特异性表达载体的构建

• 作者: 李菊芳 牛长红
• 来源期刊: 中国科技博览
• 学科: 生物学
• 关键词: 人乳铁蛋白 分子克隆 乳腺特异性表达 载体构建
• 年，卷（期）: 2009,（35）
• 所属期刊栏目: 应用技术
• 页码范围: 282-283
• 页数: 2页
• 分类号: Q785
• 字数: 2007字
• 语种: 中文

摘要

人乳铁蛋白(human lactoferrin,hLf)是一种铁结合性糖蛋白,具有多种重要的生理功能,因其巨大的经济价值和使用价值而引起广泛关注.目前已在小鼠、奶牛、昆虫、烟草等系统中表达了重组的人乳铁蛋白.但生产的hLf远远不能满足市场需求,鉴于乳腺反应器的优越性,所以应用基因工程大量生产乳腺特异性表达的hLf具有重要的实际意义.本研究先将hLf进行分子克隆,然后经限制性内切酶Pme I切割和胶凹收获得hLf片断,与此同时,将真核表达载体pBC I用限制性内切酶xho I消化并进行末端修饰,然后将其与hLf片断进行连接,最后将连接产物转化大肠杆菌并筛选阳性重组子.经PCR鉴定和限制性内切酶分析,结果表明成功构建了含有山羊乳腺细胞特异性表达启动子的人乳铁蛋白基因真核表达载体pBC I-hLf,这就为hLf在乳腺组织中的特异性表达奠定了基础.