黄河鲤生长激素基因cDNA的克隆和原核高效表达

• 作者: 常重杰 杜启艳 王松涛 陈丽丽
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 黄河鲤 生长激素 基因克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2009,（14）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 6369-6371,6386
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 3849字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2009.14.024

摘要

[目的]研究黄河鲤生长激素基因cDNA的克隆和原核高效表达.[方法]从黄河鲤脑垂体中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增并克隆黄河鲤的生长激素(GH)基因cDNA,分析其核苷酸序列和推测的氨基酸序列.[结果]经克隆得到的黄河鲤生长激素基因的开放阅读框包括633个核苷酸,编码210个氨基酸,其中包括22个氨基酸的信号肽和188个氨基酸的成熟肽.将GH成熟肽的cDNA扩增并克隆入表达载体pET-28a,在大肠杆菌BL21(DE3)表达N端含6个组氨酸的融合多肽.SDS-PAGE结果表明,0.1 mmol/L IPTG诱导表达的蛋白约为23.5 kD,其表达量超过蛋白总量的50%,主要为不溶性的包涵体.包涵体经尿素溶解和亲和层析,获得了单一蛋白条带.[结论]该研究克隆到黄河鲤的生长激素基因,构建其原核表达质粒,得到了高效表达的基因工程菌.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	常重杰	河南师范大学生命科学学院	97	836	15.0	24.0
2	杜启艳	河南师范大学生命科学学院	85	720	14.0	22.0
3	陈丽丽	新乡学院生命科学与技术系	19	109	5.0	9.0
4	王松涛	新乡医学院解剖学教研室	27	106	7.0	8.0