抗人红细胞单链抗体(ScFv)-伪狂犬病毒(PRV)gE蛋白双功能融合蛋白的构建及生物学活性检测

• 作者: 吴健敏 廖文军 王仰杰 白安斌 覃建飞 覃绍敏
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪伪狂犬病毒 gE基因 抗人红细胞单链抗体 原核表达
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 562-566
• 分类号: S8
• 字数: 4391字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2010.03.023

摘要

利用特异性引物从重组质粒pMD-2E8ScFv和pMD-gE中PCR扩增出2E8基因(抗人红细胞H抗原单链抗体基因)和kgE基因(PRVgE主要抗原编码区),采用重叠延伸(SOE)PCR法拼接成融合的双功能分子2E8kgE,经BamH I和EcoR I双酶切,纯化后,克隆至BamH I和EcoR I双酶切的表达载体pET-Trx中,构建了原核表达载体pET-Trx-2E8kgE;将pET-Trx-2E8kgE转化至BL21plysS中,在IPTG诱导下表达具有双功能的融合蛋白,经过SDS-PAGE和Western-blot检测;结果表明,重组菌BL21plysS表达出约60.1 kD的目的蛋白,与猪伪狂犬标准阳性血清发生特异性反应.红细胞凝集试验证实,2E8kgE融合蛋白既能够与人红细胞结合,又能够与PRV抗体反应,具有双功能特性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	覃绍敏		17	129	6.0	11.0
2	白安斌		42	319	11.0	15.0
3	吴健敏		50	306	10.0	14.0
4	王仰杰		3	12	2.0	3.0
5	廖文军	广西大学动物科学技术学院	6	35	3.0	5.0
9	覃建飞		1	6	1.0	1.0