人血管内皮细胞生长因子165重组腺病毒的构建及其在真核细胞中的表达

• 作者: 余永桂 杨健 程鑫华 黄振华
• 来源期刊: 武汉大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: hVEGF165 基因转染 重组腺病毒
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 430-434
• 分类号: Q782
• 语种: 中文

摘要

目的:体外构建人血管内皮生长因子165(hVEGF165)的腺病毒表达载体,并检测其在HEK293细胞中的表达.方法:从重组质粒pcDNA3/hVEGF165中获得hVEGF165,经酶切及测序鉴定,将hVEGF165基因亚克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV,重组穿梭质粒经酶切线性化后,与pAEdasyl质粒在大肠杆菌BSJ183中进行同源重组,线性化后转染HEK293细胞进行包装扩增获取重组病毒上清.同时应用RT-PCR及ELISA法检测hVEGF165的表达.结果:目的基因的测序结果与人VEGF165序列(Genbank)相符.转染后经RT-PCR和ELISA检测证实转染重组质粒组hVEGF165 mRNA及蛋白表达,而转染空质粒组及未转染组没有检测到hVEGF165的表达.结论:本研究构建了人VEGF165重组腺病毒表达载体pAd-hVEGF165,并能成功地在HEK293细胞中表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨健	武汉大学医学院	84	505	14.0	19.0
3	程鑫华	武汉大学医学院	11	30	4.0	4.0
5	黄振华	郧阳医学院附属人民医院显微骨科	11	20	3.0	4.0
6	余永桂	郧阳医学院附属人民医院显微骨科	18	37	4.0	5.0