大鼠钙结合蛋白S100A9基因克隆、表达及纯化研究

• 作者: 宋凯 尹磊淼 张庆华 徐玉东 杨永清 王宇 魏颖
• 来源期刊: 中国医药生物技术
• 学科: 医学
• 关键词: 钙结合蛋白质类 遗传载体 基因表达 自身免疫性疾病
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 405-409
• 分类号: R3
• 字数: 3062字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2010.06.001

摘要

目的 构建大鼠钙结合蛋白S100A9的原核表达质粒并获得纯化重组蛋白.方法 根据大鼠S100A9基因mRNA序列,设计PCR引物,常规扩增后重组连入原核表达载体pET32a,并进行序列测定.利用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)和不同温度诱导表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定结果,并亲和层析纯化重组蛋白.结果 PCR扩增获得的条带与预期的DNA表达片段大小一致,克隆构建了pET-32a-S100A9原核表达载体,测序结果与预期完全一致,经亲和层析纯化获得毫克级纯化重组蛋白,并发现该蛋白在21℃有比较强的表达.结论 为进一步探讨S100A9蛋白生物学功能奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张庆华		16	148	6.0	12.0
2	尹磊淼	上海中医药大学上海市针灸经络研究所	26	75	5.0	7.0
3	徐玉东	上海中医药大学上海市针灸经络研究所	26	76	5.0	7.0
4	王宇	上海中医药大学上海市针灸经络研究所	47	201	7.0	13.0
5	宋凯		3	7	2.0	2.0
6	杨永清	上海中医药大学上海市针灸经络研究所	40	204	7.0	13.0
7	魏颖	上海中医药大学上海市针灸经络研究所	6	22	3.0	4.0