沙门氏菌草酰乙酸脱羧酶在大肠杆菌中的表达、纯化及其生化鉴定

• 作者: 冉婷婷 徐朗莱 王伟武 郑新艳 齐立辉
• 来源期刊: 南京农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 草酰乙酸脱羧酶 Na+泵 酶纯化 生化特性
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 81-86
• 分类号: S814.1
• 字数: 4539字
• 语种: 中文

摘要

为深入了解沙门氏菌草酰乙酸脱羧酶的生化特性及功能,将该酶基因克隆到表达载体中,转入大肠杆菌中诱导表达,表达产物经monomeric avidin-Sepharose亲和层析分离纯化,获得了纯的沙门氏菌草酰乙酸脱羧酶.结果表明:纯化后的草酰乙酸脱羧酶经SDS-PAGE检测,呈现3条蛋白谱带,相对分子质量分别为65×103、46×103、8.8×103左右;该酶不耐高温,50 ℃温浴1 h后活力几乎完全丧失;其最适pH为6.0左右;1 mmol·L-1Zn2+、0.5 mmol·L-1草酸和20 mmol·L-1丙酮酸几乎完全抑制该酶的活力,10～20 mmol·L-1NaCl对该酶有明显激活作用,但200～500 mmol·L-1的NaCl对该酶却有明显抑制作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王伟武	南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室	3	5	1.0	2.0