外源性核仁素转基因小鼠的构建与鉴定

• 作者: 周斌 蒋碧梅
• 来源期刊: 中国动脉硬化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 核仁素 转基因 心肌细胞 小鼠
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 页码范围: 676
• 分类号: R363
• 语种: 中文

摘要

目的 最近研究表明核仁素(nucleolin,Ncl)蛋白作为一种内源性保护蛋白,在心肌细胞受损过程中发挥了重要的内源性保护作用.以往对核仁素发挥心肌保护作用的机制研究常局限于细胞水平.本研究构建并鉴定了携带有外源核仁素基因的转基因小鼠,为从整体水平上研究核仁素对心肌功能的影响,发挥心肌保护作用的机制提供动物模型.方法 采用基因重组法将小鼠核仁素(Ncl)基因的全长cDNA置于α-肌球蛋白重链(α-MHC)启动子下游构建成α-MHC-Ncl重组载体,通过双酶切及基因测序鉴定其正确性;通过原核显微注射将该载体导入小鼠受精卵原核中,经注射且状态良好的受精卵回输至假孕雌鼠输卵管中,剪取0.5 cm仔鼠的鼠尾,收集DNA,进行PCR鉴定.结果 双酶切及基因测序显示成功构建了α-MHC-Ncl重组质粒,将其显微注射到小鼠受精卵中,得到G0代小鼠106只,PCR确定了5只整合有Ncl基因的首建鼠.结论 核仁素基因可以整合到小鼠体内,得到的转基因小鼠可能成为有效的动物模型,用于研究核仁素在心肌保护方面发挥的生物学作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周斌	中南大学湘雅医学院病理生理学教研室	18	157	7.0	12.0
2	蒋碧梅	中南大学湘雅医学院病理生理学教研室	39	203	9.0	11.0