小麦条锈菌PsNCS1基因的克隆及转录表达特征

• 作者: 丁可 代西维 康振生 张洪 段迎辉 郭军 陈玥颖 黄丽丽
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 小麦条锈菌 神经钙离子感应蛋白 基因克隆 实时定量RT-PCR
• 年，卷（期）: 2010,（7）
• 页码范围: 963-969
• 分类号: Q786
• 语种: 中文

摘要

[目的]克隆小麦条锈菌神经钙离子感应蛋白基因PsNCS1,分析其在病菌不同发育时期的表达水平.[方法]利用文库筛选和RT-PCR技术克隆PsNCS1的cDNA序列,采用生物信息学技术预测分析该基因编码蛋白的保守结构域及基本特性,构建系统发育树;运用实时荧光定量RT-PCR技术分析PsNCS1在病菌不同生长发育时期的表达水平.[结果]PsNCS1全长cDNA为1007 bp(GenBank登录号GU134621),开放阅读框为573 bp,编码190个氨基酸,分子量为22.17 kDa,等电点为4.96.编码蛋白含有4个钙结合蛋白的保守结构域EF-hand,并且具有N末端豆蔻酰化特征.编码蛋白与担子菌门真菌NCS蛋白相似性最高,其中与小麦秆锈菌的NCS亲缘关系最近,序列相似性达96%.PsNCS1在夏孢子和芽管时期表达量较高,均超过其他发育阶段基因表达量的2倍.[结论]PsNCS1可能参与了条锈菌夏孢子的形成和芽管的延伸.PsNCS1的克隆与表达分析为进一步研究条锈菌细胞钙信号传导机理和致病机制奠定了基础.