实时荧光定量PCR检测大鼠VEGF mRNA方法的建立及初步应用

• 作者: 李茜 杨学文 詹瑧 韩曼丽 高峰
• 来源期刊: 分子诊断与治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 实时荧光定量PCR 血管内皮生长因子 大鼠
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 115-118
• 页数: 4页
• 分类号: R4
• 字数: 2709字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6929.2010.02.011

摘要

目的 建立大鼠血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)实时荧光定量PCR检测方法,对健康大鼠不同组织中VEGF mRNA水平进行检测分析.方法 跨内含子设计引物和TaqMan探针,扩增片段TA克隆人pGEM-T载体,制成标准品,分析其特异性、灵敏性和重复性;提取健康大鼠不同部位组织(肺、心、肝脏、肾脏、脑、胃、肠和颌下腺)总RNA,分析其VEGFmRNA表达水平.结果 测序及电泳条带证实PCR反应的特异性.批内CV为2.0%～6.7%,批间CV值为3.5%～10.6%,r>0.99;肺组织中VEGF mRNA表达最高,与其他任意组相比差异均具有统计学意义(P<0.05),其它各组织间差异无统计学意义.结论 本研究成功建立了检测大鼠VEGFmRNA的实时荧光定量PCR方法,具有高灵敏、高特异、高重复性的特点;健康大鼠不同部位组织中VEGFmRNA的表达水平分析为以后研究疾病大鼠模型表达水平奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	詹瑧		76	607	13.0	19.0
2	杨学文		13	84	5.0	9.0
4	李茜		19	100	6.0	10.0
5	高峰	江苏省中医院检验科	28	81	6.0	8.0
8	韩曼丽	南京市中医院检验科	2	27	2.0	2.0