检测EV71和EV-U的TaqMan-LNA探针多重荧光RT-PCR的建立

• 作者: 吴斌 徐岚 徐顺高 杨静 茅凌翔 葛琴娟 许化溪 陈建国 鲍务新 黄新祥
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: TaqMan-LNA探针 多重荧光定量RT-PCR 肠道病毒71型(EV71) 肠道病毒通用型(EV-U) 手足口病
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 327-329
• 页数: 3页
• 分类号: R373.2
• 语种: 中文

摘要

目的 建立一种针对手足口病病原体的快速准确检测方法.方法 利用TaqMan-LNA探针建立多重荧光定量RT-PCR方法,同时检测肠道病毒71型(EV71)和肠道病毒通用型(EV-U),用含有目的 序列RNA的标准品制备标准曲线,对病毒进行准确定量,同时对该方法的特异性、灵敏度、重复性进行评估.结果 用TaqMan-LNA探针多重荧光RT-PCR法检测CoxA16、CoxB2、EV71病毒和其他人类病毒RNA,证实其特异性为100%;对EV71和EV-U的检测灵敏度均达到102拷贝/μ1;将EV71和EV-U的RNA标准品进行重复性实验,其批内、批间变异系数分别为0.97%～2.02%和0.89%～2.13%.结论 本方法灵敏度较高,特异性强,重复性好,适用于手足口病的临床检测.