同时分离和培养兔外周血平滑肌祖细胞和内皮祖细胞

• 作者: 周六化 孙则禹 戴玉田 杨斌 陈贇
• 来源期刊: 南京大学学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 平滑肌祖细胞 内皮祖细胞 平滑肌细胞 组织工程 再生医学 生长因子 血管化
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 页码范围: 92-99
• 页数: 8页
• 分类号: R694|Q813.1
• 字数: 6115字
• 语种: 中文

摘要

同时分离和培养兔外周血平滑肌祖细胞(SPC)和内皮祖细胞(EPC),为组织工程膀胱的构建和血管化提供种子细胞.分离新西兰兔外周血中的单个核细胞,分别进行SPC和EPC的分离和培养;同时,培养兔膀胱平滑肌细胞(BSMC)作为对照.细胞爬片,观察细胞摄取Dil-AcLDL和结合FITC-UEA-1的能力;间接免疫荧光染色观察平滑肌肌动蛋白(SMA)、结蛋白(Desmin)、KDR、eNOS和vWF的表达情况;进行细胞增殖实验,观察PDGF-BB,VEGF对SPC和EPC的增殖作用.结果发现,培养1周后出现SPC克隆和EPC克隆,SPC呈梭形,长短不一;EPC形态均一,呈典型的鹅卵石形;培养的BSMC形态均一,为长梭形,呈峰谷样形态.利用克隆环分离SPC和EPC克隆,继续培养可得到高纯度的SPC和EPC.SPC不摄取Dil-AcLDL,不结合FITC-UEA-1;SPC表达SMA、Desmin和KDR,不表达eNOS和vWF.EPC同时摄取Dil-AcLDL和结合FITC-UEA-1;EPC表达eNOS、vWF和KDR,不表达SMA和Desmin.BSMC仅表达SMA和Desmin.PDGF-BB仅能促进SPC增殖,VEGF仅能促进EPC增殖,均具有剂量依赖效应.本研究建立了同时分离和培养外周血SPC和EPC的技术,所培养的细胞具有较高的纯度,可以作为种子细胞进行组织工程膀胱及其血管化的研究和应用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	戴玉田	南京大学医学院附属鼓楼医院泌尿外科	95	638	14.0	19.0
2	孙则禹	南京大学医学院附属鼓楼医院泌尿外科	104	725	15.0	22.0
3	周六化	南京大学医学院附属鼓楼医院泌尿外科	5	8	2.0	2.0
4	杨斌	南京大学医学院附属鼓楼医院泌尿外科	27	224	8.0	14.0
5	陈贇	南京大学医学院附属鼓楼医院泌尿外科	3	10	2.0	3.0