猪巨细胞病毒gB蛋白抗原表位富集区的表达和抗原性的分析

• 作者: 余兴龙 向卫军 李晶 李润成 李薇 王亚 葛猛 黄泽彬
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 猪巨细胞病毒 gB基因 原核表达 间接ELISA
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 免疫学
• 页码范围: 126-130
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 4009字
• 语种: 中文

摘要

为表达猪巨细胞病毒(PCMV)gB基因,本研究根据GenBank登录的PCMV gB基因序列设计1对引物,以感染PCMV猪肺细胞总DNA为模板,采用PCR扩增得到gB基因片段,克隆于pMD-18T并进行核苷酸序列测定.利用DNAStar分析gB蛋白的抗原表位,选择抗原表位富集的2个基因片段(命名为PCMVgB1和PCMVgB2)分别克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,构建重组表达质粒并转化Rosetta(DE3)宿主菌.结果显示:扩增的gB基因与GenBank登录的PCMV gB基因的核苷酸同源性在97.6%～98.9%之间,推导的氨基酸同源性在97%～98.6%之间.经IPTG诱导的含pET-gB1和pET-gB2重组质粒的宿主菌可表达重组gB1和gB2蛋白,SDS-PAGE显示分子量约为62ku和36 ku.Western blot和间接ELISA结果表明,重组gB1和gB2蛋白均具有反应原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余兴龙	湖南农业大学动物医学院	102	335	8.0	14.0
2	李润成	湖南农业大学动物医学院	116	254	7.0	12.0
3	向卫军	湖南农业大学动物医学院	8	20	3.0	4.0
4	李薇	湖南农业大学动物医学院	53	41	4.0	5.0
5	李晶	湖南农业大学动物医学院	19	49	5.0	6.0
6	黄泽彬	湖南农业大学动物医学院	3	17	3.0	3.0
7	葛猛	湖南农业大学动物医学院	20	27	3.0	4.0