人γ干扰素的高效表达

• 作者: 于洪雪 许崇利 许崇波 谢莹
• 来源期刊: 中国兽药杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 大肠杆菌 hIFN-γ基因 基因表达 优化
• 年，卷（期）: 2010,（11）
• 页码范围: 17-21
• 分类号: R318
• 字数: 4520字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-1280.2010.11.005

摘要

采用限制性核酸内切酶酶切鉴定含hIFN-γ基因的重组质粒,SDS-PAGE检测不同条件下hIFN-γ基因的表达情况,用Western blot和亲和层析对表达产物进行鉴定和纯化,并对表达条件进行优化.经酶切鉴定和核苷酸序列测定证实重组质粒pET32a(+)-hIFN-γ含有hIFN-γ基因且阅读框架正确,以IPTG诱导hIFN-γ基因表达的优化条件是:培养基pH 7.0,培养温度37℃,IPTG浓度0.8 mmol/L,菌体生长密度OD600达到0.8时加入IPTG,诱导时间5h,此时hIFN-γ蛋白表达量为52%.从而实现了hIFN-γ基因的高效表达并优化了其表达工艺.从而为hIFN-γ的生物活性和生产工艺研究提供了可靠的试验数据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许崇波	大连大学医学院	70	565	12.0	20.0