利用RNA干扰抑制牛胎儿成纤维细胞中朊蛋白基因prnp的表达

• 作者: 宋永利 张海林 张涌 战丽萍 程胖
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 传染性海绵状脑病 朊蛋白 RNAi 朊蛋白基因prnp 牛海绵状脑病 牛胎儿成纤维细胞
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1091-1097
• 分类号: S8
• 字数: 5238字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2010.06.009

摘要

疯牛病是由朊蛋白基因prnp编码的正常朊蛋白PrPc发生构象变化为致病性朊蛋白PrPsc而引起的传染性疾病,PrPsc在中枢神经的聚集引发了动物的传染性海绵状脑病.降低(下调)PrPc的表达量使其减少向PrPsc转化,是抑制疯牛病的有效途径.本研究利用RNAi技术,针对牛源cDNA序列设计了3段PrPc干扰序列及一个阴性对照,将其连接到RNA干扰载体pGenesil-1上,转染牛胎儿成纤维细胞,通过荧光定量PCR和Western blot检测有干扰序列的有效性,并用700μg/mL G418对细胞进行药物筛选.结果表明,3对干扰片段的抑制效率分别是51.2%、85.7%和74.6%,阴性对照的干扰效率是2.05%,得到了一个较为有效地干扰片段,并且筛选出了稳定转染的细胞单克隆,为进一步的体细胞核移植提供供体细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张涌	西北农林科技大学动物医学院	105	815	13.0	25.0
2	张海林	西北农林科技大学动物医学院	2	4	1.0	2.0
3	程胖	西北农林科技大学动物医学院	2	4	1.0	2.0
4	宋永利	西北农林科技大学动物医学院	3	7	2.0	2.0
5	战丽萍	西北农林科技大学动物医学院	1	0	0.0	0.0