抗鹅细小病毒VP3蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

• 作者: 李俚 王君伟 荆志强 郭鹭 鞠环宇 马波
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 鹅细小病毒 VP3重组蛋白 单克隆抗体 特性鉴定
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 169-173
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.2
• 语种: 中文

摘要

利用已构建好的pET-30a重组菌E.coli Rosetta(DE3)表达鹅细小病毒(GPV)VP3重组蛋白,经Ni-NTA亲和层析纯化后作为免疫原,经腹膜腔接种4～6周龄BALB/c小鼠3次,末次免疫后第3 d取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合.用建立的间接ELISA方法进行筛选,经4次亚克隆,最终获得4株能稳定分泌抗GPV VP3单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1F1、2A9、3B11和4A2.亚类鉴定结果显示,单抗1F1为IgG2b亚型,其余3株单抗为IgG1亚型,轻链均为κ链.经间接ELISA检测,单抗1F1、2A9、3811和4A2的腹水效价分别为1:819 200、1:1 638 400、1:409 600和1:819 200.Westernblot分析表明,获得的4株单克隆抗体均能特异性识别GPV VP3重组蛋白;间接免疫荧光试验证明,这4株单抗能够与天然GPV结合.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马波		71	491	14.0	18.0
2	王君伟		214	1491	20.0	26.0
3	鞠环宇		9	37	3.0	6.0
4	荆志强		4	16	2.0	4.0
5	李俚		7	79	5.0	7.0
6	郭鹭		3	11	1.0	3.0