甲型H1N1流感病毒NA、PB2和PA表位抗原区段的克隆和表达

• 作者: 何竞 修冰水 冯晓燕 凌世淦 宋晓国 张向颖 张贺秋 戴振华 朱翠侠 杨静 王升启 王国华 陈坤
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 甲型H1N1流感病毒 神经氨酸酶 聚合酶B2 聚合酶A 表位抗原区段 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 17-21
• 页数: 5页
• 分类号: Q789
• 字数: 4460字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2010.01.004

摘要

目的:分析比对甲型H1N1流感病毒神经氨酸酶(NA)、聚合酶B2(PB2)和聚合酶A(PA)抗原的序列,克隆表达保守的和变异的表位抗原区段,为免疫学诊断试剂的研究提供候选抗原.方法:采用BioSun生物学软件比较新近公布的A/H1N1流感病毒和我国猪流感病毒浙江株NA、PB2和PA抗原序列,并预测筛选NA、PB2和PA抗原表位保守区段与变异区段,采用PCR逐步合成法合成NA、PB2和PA表位抗原区段基因序列,并利用原核表达载体pBVIL1进行克隆表达.结果:筛选的保守表位抗原区段和变异表位抗原区段为NA/135～180 aa、NA/310～350 aa、PB2/1～80 aft、PA/41～90 aa、PA/231～280 aa和PA/341～400 aa;获得6条表位抗原区段基因序列,且6条表位抗原区段均获得了高效表达,得到纯化后的抗原.结论:获得了A/H1N1流感病毒NA、PB2和PA表位抗原区段,为进一步研制特异的甲型流感病毒快速诊断试剂提供了抗原储备.