尘螨变应原Der f1植物表达载体的构建及表达

• 作者: 吴洁 周鹰 崔玉宝 彭江龙 牛莉娜 王华民
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 尘螨 Der f1 马铃薯X病毒(PVX) 植物表达
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 250-253
• 页数: 4页
• 分类号: R384.4
• 字数: 3942字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建尘螨变应原Der f1植物表达载体并侵染烟草叶片表达.方法:从保存的含pET28a(+)-Der f1的甘油菌株中扩增Der f1基因,并克隆到质粒载体中,提取质粒,进行测序;以ClaⅠ、SalⅠ双酶切,将Der f1基因克隆到马铃薯X病毒(PVX)载体中,构建植物病毒表达载体;将PVX-Der f1转化脓杆菌,挑取Kan、Tet抗性阳性的菌株侵染烟草叶片进行蛋白表达,采用SDS-PAGE和Western blot对表达蛋白进行鉴定和分析.结果:经SDS-PAGE分析,有4株烟草叶片蛋白提取物在34Mr处有特异性蛋白条带;经Western blot进一步验证其变应原,结果显示,烟草叶片中获得的重组蛋白在34M_r处与阳性血清发生特异性结合,而与阴性血清并不发生结合.结论:成功构建了植物病毒表达载体PVX-Der f1并获得表达,为尘螨变应原Der f1的研究提供新思路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭江龙	海南医学院微生物学与免疫学教研室	28	93	6.0	8.0
2	崔玉宝	盐城卫生职业技术学院卫生技术研究所	45	110	6.0	9.0
3	王华民	海南医学院微生物学与免疫学教研室	37	232	9.0	14.0
4	周鹰	盐城卫生职业技术学院卫生技术研究所	33	73	4.0	7.0
5	牛莉娜	海南医学院微生物学与免疫学教研室	29	68	4.0	7.0
6	吴洁	海南医学院微生物学与免疫学教研室	33	142	7.0	10.0