粉尘螨Ⅰ类变应原瞬时表达载体的构建及其在烟草中的表达

• 作者: 姜玉新 李朝品 李秋雨 石连
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 粉尘螨 瞬时表达 本氏烟 重组质粒
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1088-1092
• 页数: 5页
• 分类号: R384.4
• 字数: 3889字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2012.11.006

摘要

目的 构建粉尘螨I类变应原瞬时表达载体TRBO-Der f 1并观察其在烟草中的表达.方法 以粉尘螨总RNA为模板,采用RT-PCR方法 扩增Der f 1基因并定向克隆到瞬时表达载体TRBO中,转化根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)GV1301株后,抽提质粒进行酶切及PCR鉴定.将含TRBO-Der f 1重组质粒的GV1301注射本氏烟叶片,SDS-PAGE电泳检测注射3、4、5、6 d后Der f 1的表达,并进行Western blot鉴定.结果 电泳及测序表明Der f 1基因克隆成功,大小为627 bp.经PCR及酶切结果 证实重组质粒TRBO-Der f 1成功转入根癌农杆菌.SDS-PAGE电泳检测表明,该蛋白于第5和6 d在烟草叶片中高表达,并通过Western blot得到验证.结论 粉尘螨I类变应原Der f 1成功表达于烟草叶片,为进一步研究源于植物的粉尘螨疫苗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姜玉新	皖南医学院医学寄生虫学教研室	98	399	10.0	14.0
2	李朝品	皖南医学院医学寄生虫学教研室	235	781	13.0	17.0
3	石连	安徽理工大学医学院病原生物与免疫学教研室	5	12	1.0	3.0
4	李秋雨	皖南医学院医学寄生虫学教研室	1	0	0.0	0.0