环介导等温扩增法检测孕妇血清中单纯疱疹病毒Ⅰ型方法的建立

• 作者: 朱斌 潘淑静 陈道桢 顾菊萍
• 来源期刊: 苏州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 环介导的等温扩增 单纯疱疹病毒Ⅰ型 基因检测 孕妇血清
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 763-766
• 分类号: R446
• 语种: 中文

摘要

目的 建立稳定、可靠的环介导等温扩增法(LAMP)快速检测孕妇血清中单纯疱疹病毒Ⅰ(HSV-I)DNA的方法 .方法 通过对影响LAMP反应体系的几个主要因素进行优化,确定最佳反应条件,并对其特异性、灵敏度及可靠性进行评判.结果 LAMP检测HSV-I DNA的最佳反应条件:甜菜碱和Mg2+的终浓度分别为1.0 mol/L和10 mmol/L,于62℃恒温反应1 h.扩增产物可被HinfI消化,理论上检测下限可达10个拷贝,与定量PCR相比符合率达94.5%.结论 本实验建立的LAMP检测HSV-I的方法 具有灵敏度高、特异性强、操作简便等特点,适合基层用于HSV-I筛查.