猪繁殖与呼吸综合征病毒SCQ株M蛋白基因截断片段原核表达载体构建及其表达的初步研究

• 作者: 万莉 冯迎春 王志彪 陈进会 雷燕 韩国全 颜其贵 黄伟
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 M蛋白基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 页码范围: 37-39,44
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 3626字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2010.12.016

摘要

为表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)M蛋白主要抗原表位基因序列,参照GenBank中发表的PRRSV SCQ株M蛋白基因设计并合成一对特异性引物,通过PCR方法从重组质粒pMD18-T-M扩增得到缺失N端跨膜区的M蛋白基因片段dM(deleting M),将其与pMD19-T simple vector连接,经测序正确后克隆至高效原核表达载体pGEX-4T-1,得到重组表达载体pGEX-4T-1-dM,并将其转化大肠杆菌Rosetta(DE3),经IPTG于37℃诱导,PRRSV M基因获得表达.经SDS-PAGE分析,所表达的融合蛋白分子量约为35 kDa.以纯化的重组蛋白作为抗原,经Western Blot分析结果表明该重组蛋白可被PRRSV阳性血清所识别,可用于PRRSV的检测.