猪丹毒丝菌天然SpaA和重组SpaA-N免疫保护效果的评价

• 作者: 何翠 吾鲁木汗·那孜尔别克 张磊 彭清忠 恩特马克·布拉提白
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪丹毒丝菌 rSpaA-N 免疫保护 亚单位疫苗
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 侵染和免疫
• 页码范围: 367-372
• 页数: 6页
• 分类号: S852
• 语种: 中文

摘要

[目的]本试验以小鼠为动物模型,评估了猪丹毒丝菌重组表面保护性抗原A的N端保护区域(rSpaA-N)和天然SpaA的免疫保护效果.[方法]将猪丹毒丝菌C43311株SpaA-N以可溶形式表达在大肠杆菌BL21中,用GSTBind Resin纯化试剂盒纯化rSpaA-N,采用电洗脱法从猪丹毒丝菌C43311株NaOH提取抗原中纯化天然SpaA,将rSpaA-N、天然SpaA和NaOH提取抗原制成亚单位疫苗,同时设GST及生理盐水对照组,间隔2周分3次皮下免疫小鼠,第3次免疫后2周用100LD_(50)猪丹毒丝菌C43065株进行腹腔攻毒,采用间接EL,ISA方法检测免疫组小鼠血清的抗体动态变化.[结果]SDS-PAGE结果显示,采用GST BindResin纯化试剂盒和电洗脱法纯化得到了66 kDa的rSpaA-N和64 kDa的天然SpaA,蛋白含量分别为1.34 mg/mL和1.26 mg/mL,而Western印迹结果表明rSpaA-N和纯化前后的SpaA具有良好的免疫反应性.保护试验结果表明,不同免疫剂量的rSpaA-N组、天然SpaA组和NaOH提取抗原组均能完全保护小鼠受强毒株C43065的致死性攻击,而GST组和生理盐水组小鼠攻毒后全部死亡.ELISA检测结果表明,在不同免疫剂量的rSpaA-N组、天然spaA组和NaOH提取抗原组小鼠血清中的抗体效价之间无显著差异(P<0.05).[结论]本研究结果表明rSpaA-N具有良好的免疫保护作用,可以作为猪丹毒亚单位疫苗.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吾鲁木汗·那孜尔别克	吉首大学生物资源与环境科学学院	19	142	8.0	11.0
2	恩特马克·布拉提白	吉首大学生物资源与环境科学学院	22	163	8.0	11.0
3	彭清忠	吉首大学生物资源与环境科学学院	29	171	8.0	12.0
4	何翠	吉首大学生物资源与环境科学学院	4	31	2.0	4.0
5	张磊	吉首大学生物资源与环境科学学院	4	14	1.0	3.0