人乳头瘤病毒L1基因与丹毒丝菌SpaA-N优势抗原表位序列的嵌合重组质粒构建及活性鉴定

• 作者: 庆格乐图 晏鹏飞 李江伟 杨薇薇 苏幼红
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 医学
• 关键词: 丹毒丝菌 SpaA-N 表位预测 HPV-16 L1 嵌合质粒 瞬时表达 杀菌活性
• 年，卷（期）: 2011,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 145-150
• 分类号: R392.1
• 字数: 4360字
• 语种: 中文

摘要

为确定丹毒丝菌表面保护性抗原A的N-末端(SpaA-N)优势抗原表位,研发新型表位DNA嵌合疫苗,利用生物信息学软件对丹毒丝菌SpaA-N的优势B细胞抗原表位进行预测,以重叠PCR将优势表位插入人乳头瘤病毒16型的主要衣壳蛋白( HPV-16 LI) HI环结构的编码序列中,构建获得重组嵌合质粒pcDNA3-HPV-LI -△spaA.该重组质粒经体内、外瞬时特染后,RT-PCR均扩增获得了1 500 bp左右的目的片段.免疫印迹试验显示,体外转染嵌合质粒的细胞总蛋白能够与GST-SpaA-N重组蛋白免疫血清在56 kD处产生特异性结合.ELISA分析显示嵌合质粒可在小鼠体内产生差异显著的特异性抗体(P＜0.01),抗体滴度为1:1 000.此外,pcDNA3-HPV-L1-△spaA制备的抗血清至少可在1∶10稀释度条件下,介导外源补体对半数以上的菌体进行杀伤.该研究表明,获得的SpaA-N表位DNA嵌合疫苗具有免疫活性,为研发安全有效的丹毒丝菌新型DNA疫苗提供了一个新思路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	苏幼红	新疆大学生命科学与技术学院	10	52	5.0	7.0
2	李江伟	新疆大学生命科学与技术学院	25	65	5.0	7.0
3	庆格乐图	新疆大学生命科学与技术学院	3	7	1.0	2.0
4	杨薇薇	新疆大学生命科学与技术学院	2	0	0.0	0.0
5	晏鹏飞	新疆大学生命科学与技术学院	4	11	2.0	3.0