猪丹毒丝菌SpaA基因原核表达及表达蛋白质的免疫原性分析

• 作者: 姚焱彬 孙裴 李郁 杨志鹏 陆萍 魏建忠
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪丹毒丝菌 SpaA基因 原核表达 免疫原性 免疫保护力
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 492-500
• 页数: 9页
• 分类号: S855.12
• 字数: 5414字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2017.03.012

摘要

旨在克隆表达猪丹毒丝菌SpaA蛋白,分析其免疫原性,为猪丹毒新型疫苗的研发奠定基础.运用PCR扩增SpaA基因,连接至pGEX-6P-1载体,将阳性重组质粒转化大肠杆菌Rosetta (DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达产物,GST亲和层析纯化融合蛋白质,Western blot鉴定;纯化SpaA蛋白免疫小鼠,间接ELISA检测血清中IgG和Th1、Th2相关细胞因子;不同致病力猪丹毒丝菌攻击免疫小鼠,观察病理组织变化及其免疫保护率.结果显示,猪丹毒丝菌SpaA基因在大肠杆菌中实现表达,获得大小为75 ku的纯化目的蛋白质.该蛋白质能特异性识别猪丹毒丝菌抗血清,可诱导小鼠产生较高水平的特异性抗体IgG,并使TNF-β、IFN-γ、IL-5、IL-10含量显著升高,对攻毒菌的免疫保护率均为100％,病理组织变化与攻毒对照组之间差异明显.可见成功获得的重组SpaA蛋白具有良好的免疫原性,能激发机体的体液免疫和细胞免疫,产生较强的免疫保护力,可以作为研发猪丹毒亚单位疫苗的候选抗原.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李郁	安徽农业大学动物科技学院	140	887	14.0	23.0
3	魏建忠	安徽农业大学动物科技学院	126	1011	16.0	24.0
4	孙裴	安徽农业大学动物科技学院	89	404	11.0	15.0
5	姚焱彬	安徽农业大学动物科技学院	12	39	4.0	5.0
6	杨志鹏	安徽农业大学动物科技学院	7	26	3.0	4.0
7	陆萍	安徽农业大学动物科技学院	7	55	3.0	7.0