沙眼衣原体质粒蛋白pORF5原核表达及免疫原性鉴定

• 作者: 何卓 吴移谋 朱翠明 李忠玉 汪世平
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 沙眼衣原体 pORF5基因 免疫原性 原核表达
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 517-520
• 页数: 4页
• 分类号: R374.1
• 字数: 2990字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建沙眼衣原体(CT)pORF5蛋白基因重组质粒pGEX-6p/pORF5,表达并纯化质粒蛋白pORF5,并鉴定其免疫原性.方法 用PCR法扩增pORF5基因,定向插入pGEX-6p原核表达载体构建原核表达重组体pGEX-6p/pORF5,重组体经酶切、PCR及测序鉴定后,经IPTG诱导在大肠杆菌中表达pORF5融合蛋白.融合蛋白纯化后免疫BALB/c鼠,ELISA及Western-blot分析pORF5质粒蛋白免疫原性及免疫反应性.结果 PCR扩增出795 bp基因片段,序列测定证实重组质粒插入片段与GenBank登陆的D型Ct一致;pORF5融合蛋白在大肠杆菌中获得高效表达;ELISA检测免疫小鼠的血清效价为1:25 600.结论 pORF5蛋白在原核细胞中可有效表达并具有较好的免疫原性,为进一步研究该蛋白的结构功能、阐明Ct的致病机制、研制基因工程疫苗提供了有利的条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱翠明	南华大学微生物学与免疫学教研室	61	211	7.0	10.0
2	吴移谋	南华大学微生物学与免疫学教研室	243	1097	14.0	22.0
3	李忠玉	南华大学微生物学与免疫学教研室	52	214	8.0	12.0
4	汪世平	中南大学湘雅医学院	88	599	12.0	19.0
5	何卓	中南大学湘雅医学院	14	101	7.0	9.0