用小鼠模型分析表达牛结核分枝杆菌Ag85B重组腺病毒的细胞免疫特性

• 作者: 周卫东 周海霞 季琰 潘志明 焦新安 胡茂志 陈祥 黄金林
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 医学
• 关键词: 抗原Ag85B 牛结核分枝杆菌 重组腺病毒 γ干扰素 CD69
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 811-816
• 分类号: R37
• 语种: 中文

摘要

[目的]构建表达牛结核分枝杆菌抗原Ag85B重组腺病毒rAd-Ag85B,并用小鼠模型分析其细胞免疫特点.[方法]采用PCR方法,扩增结核分枝杆菌Ag85B的编码基因fbpB,测序后构建pDC516-Ag85B重组质粒.利用脂质体将pDC516-Ag85B与pBHGfrt△AE1,3FLP共转染Ad293细胞包装成重组病毒rAd-Ag85B.空斑纯化后用电镜负染、目的基因转录和蛋白表达进行rAd-Ag85B验证.同时将rAd-Ag85B和rAd(wtAd)分别经皮下注射免疫BALB/c小鼠,二免二周后取小鼠脾脏细胞,进行CD69表面分子表达、淋巴细胞增殖和ELISPOT实验分析.[结果]在电镜下能观察到包装的重组病毒粒子,且在转录和蛋白水平上验证了rAd-Ag85B构建成功.免疫试验结果显示,rAd-Ag85B能激活CD4+T和CD8+T细胞表面分子CD69的表达,并引起淋巴细胞增殖.ELISPOT表明rAd-Ag85B呈现Th1免疫特点.[结论]成功构建的rAd-Ag85B能引起机体针对PPD蛋白或Ag85B多肽的Th1免疫应答.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘志明	扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室	163	1328	20.0	28.0
2	周卫东	扬州大学测试中心	44	572	15.0	22.0
3	黄金林	扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室	115	959	16.0	26.0
4	陈祥	扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室	57	525	11.0	22.0
5	胡茂志	扬州大学测试中心	33	202	7.0	12.0
6	周海霞	扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室	3	11	2.0	3.0
7	季琰	扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室	2	12	2.0	2.0