通过正交实验设计突变体组合提高甲基对硫磷水解酶OPHC2对乙基对硫磷的降解能力

• 作者: 伍宁丰 初晓宇 吕红 田健
• 来源期刊: 中国农业科技导报
• 学科: 生物学
• 关键词: 甲基对硫磷水解酶 正交实验 定点突变
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 78-83,67
• 分类号: Q55
• 字数: 4314字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0864.2010.04.15

摘要

分别自假产碱假单胞菌(Pseudomonas pseudoalcaligenes C2-1)和假单胞菌(Pseudomonas sp.1-7)中克隆得到甲基对硫磷水解酶基因ophc2和ophc3,其编码甲基对硫磷水解酶OPHC2和OPHC3的氨基酸序列相似性达98.5%,仅5个氨基酸残基不同,但酶学性质差异很大,特别是对不同底物降解特性有很大差异.OPHC2对甲基对硫磷的催化效率是OPHC3的2.75倍,对乙基对硫磷的催化效率仅为OPHC3的12.9%.为了提高OPHC2对乙基对硫磷的降解活性,以OPHC3的序列为依据,针对5个不同的氨基酸设计正交实验,对OPHC2进行组合突变,最终获得了一个突变体P165S/A169V,对乙基对硫磷的催化效率是OPHC2的1.19倍,对甲基对硫磷的催化效率是OPHC2的1.36倍.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	伍宁丰	中国农业科学院生物技术研究所	56	1134	18.0	33.0
2	初晓宇	中国农业科学院生物技术研究所	13	112	5.0	10.0
3	田健	中国农业科学院生物技术研究所	27	179	7.0	12.0
4	吕红	中国农业科学院生物技术研究所	1	0	0.0	0.0