定点突变提高菜豆环氧水解酶的对映选择性

• 作者: 宗迅成 王婷婷 胡蝶 邬敏辰 阚婷婷
• 来源期刊: 化工学报
• 关键词: 生物催化 定点突变 环氧水解酶 对氯环氧苯乙烷 对氯苯基乙二醇 分子模拟
• 年，卷（期）: 2018,（10）
• 所属期刊栏目: 生物化学工程与技术
• 页码范围: 4335-4341
• 页数: 7页
• 分类号: Q814.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.11949/j.issn.0438-1157.20180246

摘要

为了提高菜豆环氧水解酶( PvEH1)催化对氯环氧苯乙烷( pCSO)的对映选择性,利用定点突变构建了PvEH1W102L、PvEH1P137K及PvEH1I151V三种突变体,分别研究了突变体全细胞动力学拆分rac-pCSO的催化特性,优化了PvEH1W102L动力学拆分rac-pCSO的初始底物浓度及反应时间,通过分子模拟分析了PvEH1W102L对映选择性提高的机理.结果表明,最优突变体PvEH1W102L的E值为25.5,相对酶活为212.6%,分别是PvEH1的11.6倍与2.1倍;PvEH1W102L动力学拆分150 mmol·L?1rac-pCSO,反应4 h后,可获得(R)-pCSO(产率为45.62%,ees为96.30%)和(R)-对氯苯基乙二醇(产率为50.91%,eep为90.26%).分子模拟结果分析表明,PvEH1的102位色氨酸(W)突变为亮氨酸(L)降低了酶与(R)-pCSO的结合能力,从而提高了PvEH1W102L对pCSO的对映选择性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邬敏辰	江南大学无锡医学院	163	1504	22.0	29.0
2	胡蝶	江南大学无锡医学院	20	38	3.0	5.0
3	王婷婷	江南大学药学院	12	23	3.0	4.0
4	宗迅成	江南大学生物工程学院	3	4	1.0	2.0
5	阚婷婷	江南大学药学院	4	4	1.0	2.0