定点突变提高D-氨甲酰水解酶的可溶性表达

• 作者: 姜世民 姜卫红 蔡渊恒 袁野
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: D-氨甲酰水解酶 定点突变 诱导表达 可溶性 酶活
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 94-98
• 分类号: Q78
• 字数: 3559字
• 语种: 中文

摘要

采用定点突变的方法对皮氏伯克霍尔德氏菌(Burkholderia pickettii)来源的D-氨甲酰水解酶(D-carbamoylase,DCase)编码基因的3个位点A18、Y30、K34进行突变,并将获得的突变体基因片段构建入高表达载体pET-28b中,转化E coli BL21( DE3),获得带有组合三突变(A18E/Y30D/K34E)的DCase-SM表达菌株BL21/pET-DCSM.当以IPTG诱导目的蛋白表达时,发现突变菌株(DCase-SM)与出发菌株(DCase)菌株相比,目的蛋白的可溶性表达显著提高,其可溶蛋白比例约为64％；与出发菌株相比,其单位菌体酶活增加427％；另外,与本实验室前期构建的高可溶性三叠加突变体菌株DCase-M3相比,单位菌体酶活亦增加7.9％.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁野	吉林大学畜牧兽医学院	31	152	6.0	11.0
5	蔡渊恒	中科院植物生理生态研究所	1	0	0.0	0.0
6	姜世民	中科院植物生理生态研究所	1	0	0.0	0.0
7	姜卫红	中科院植物生理生态研究所	1	0	0.0	0.0