N-氨甲酰-D-氨基酸酰胺水解酶的融合表达、纯化和酶活性

• 作者: 石亚伟 袁静明 钮利喜
• 来源期刊: 中国抗生素杂志
• 关键词: pMAL- c2X质粒 N-氨甲酰- D-氨基酸酰胺水解酶 麦芽糖结合蛋白 融合表达 亲和层析
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 11-14
• 页数: 4页
• 分类号: Q342+.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-8689.2004.01.004

摘要

将菌株 SS-ori的 N-氨甲酰- D-氨基酸酰胺水解酶基因( Dcase)插入到 pMAL- c2X载体中,构建表达产物为麦芽糖结合蛋白( MBP)与 Dcase融合的重组子.该重组子在 E.coli BL21中的表达产物为融合蛋白 MBP- Dcase (76.4ka),光密度扫描表明,其表达量约占菌体超声后离心上清总蛋白的 19%.经 Amylose亲和纯化和 Superose 12凝胶排阻层析后达到了电泳纯.根据 pMAL- c2X的背景,用 Factor Xa剪切后,可得约 41.7ka的 MBP和 34.7ka的 Dcase.酶活性检测表明当用 N-氨甲酰- DL-缬氨酸做为底物 ,A600=10时,每升菌体每小时可产生 D-缬氨酸 0.78g.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁静明	山西大学生物技术研究所	34	203	8.0	12.0
2	钮利喜	山西大学生物技术研究所	16	60	4.0	6.0
3	石亚伟	山西大学生物技术研究所	33	84	5.0	7.0