金黄色葡萄球菌ClfA基因表达产物在小鼠的免疫原性分析

• 作者: 乔军 刘君 曹旭东 李贞 杨明锋 王正荣 陈创夫
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 乳房炎 金黄色葡萄球菌 凝聚因子A(ClfA) 小鼠 免疫原性
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 1584-1591
• 分类号: S852.611
• 字数: 5651字
• 语种: 中文

摘要

为分析原核表达的金黄色葡萄球菌ClfA部分基因表达产物的免疫原性,作者采用PCR方法从奶牛乳房炎病例中分离的金黄色葡萄球菌中克隆出ClfA基因的部分片段,测序后用DNAman软件进行抗原位点分析.构建原核表达质粒ClfA-pET-28a+,转化BL21(DE3)菌,经IPTG诱导表达.用His-bind柱纯化表达蛋白,加弗氏佐剂混匀后免疫小鼠.小鼠分娩后乳腺内攻菌,检查乳腺组织病理变化,乳腺组织中金葡菌数量和TNF-α水平来评价原核表达蛋白的免疫保护效果.结果显示转化BI.21(DE3)菌,经IPTG诱导可以表达CIfA蛋白.原核表达蛋白抗原免疫小鼠可以显著降低乳腺组织内金葡菌数量,TNF-a水平也显著低于对照组和全菌蛋白抗原组,提示原核表达的CIfA蛋白免疫小鼠可以减少乳腺内金葡菌定植的数量,减轻乳腺内感染造成炎症的严重程度.本研究表明原核表达金黄色葡萄球菌ClfA蛋白有一定的免疫保护效果,为奶牛乳房炎疫苗的研究提供科学依据.