慢病毒介导shRNA静默CXCR4对Eca109细胞转移特性的影响

• 作者: 娄宁 张旭 曾灿光 李小东 林勇斌 汪道峰
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 食管肿瘤 CXCR4 转移
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 761-766
• 分类号: R734.1
• 字数: 4861字
• 语种: 中文

摘要

[目的]新近研究显示CXCL12/CXCR4通路在食管癌组织中有较高的表达,本研究探讨应用慢病毒介导的RNA干扰技术,有效静默食管癌细胞株Eca109细胞CXCR4的表达.研究CXCL12/CXCR4通路对食管癌Eca109细胞转移能力的影响.[方法]以人CXCR4 mRNA编码序列作为干扰靶点,构建靶向CXCR4的vshRNA表达质粒,另构建不针对任何已知mRNA的阴性对照vshRNA表达质粒,转染相应组别细胞.研究分为控制组、阴性对照组及静默组.应用实时定量PCR及Western blot检测转染后食管癌细胞CXCR4表达的变化.Transwell侵袭小室实验以穿膜细胞的数量评估各组Eca109食管癌细胞的侵袭能力,MTT法观察Eca109各组细胞与Matrigel胶黏附能力的变化,划痕法检测迁移能力改变.[结果]成功构建CXCR4 shRNA慢病毒载体CXCR4-RNAi-Lv.QPCR及Western blot结果显示静默组Ecal09细胞CXCR4 mRNA及蛋白的表达水平较阴性对照组及空白组显著降低(P<0.05).CXCR4有效静默后,食管癌Eca109细胞黏附、侵袭及迁移能力显著下降(P<0.05).[结论]慢病毒介导的shRNA能有效地静默食管癌细胞CXCR4基因的表达,阻断CXCL12/CXCR4通路生物学效应,有效抑制食管癌Eca109细胞的转移潜能,提示CXCL12/CXCR4通路在食管鳞癌发展过程中具有重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林勇斌		2	19	2.0	2.0