梨SSR反应体系的优化

• 作者: 刘荣宁 孙文英 张玉星 陈世昌
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 梨 SSR 优化体系
• 年，卷（期）: 2010,（8）
• 页码范围: 101-105
• 分类号: S661.2
• 字数: 4024字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2010.08.027

摘要

为了丰富梨分子遗传图谱的SSR标记,以鸭梨、京白梨及鸭梨×京白梨的实生后代为试材,对影响梨SSR技术PCR反应体系中的模板DNA用量、Mg2+浓度、dNTP浓度、引物浓度、Taq DNA聚合酶用量以及每对引物的退火温度进行了探索,确立了适宜梨的SSR反应体系,即在20 μL反应体系中, 模板DNA用量为30 ng,Mg2+、dNTP和引物的最适浓度分别为1.2 mmol/L、0.15 mmol/L、0.8 μmol/L.Taq DNA聚合酶的最适用量是1.0 U.最后利用该反应体系筛选出了19个适宜梨遗传分析的SSR引物,引物的最佳退火温度为49～55℃,通过8%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳进行检测,表明该反应体系扩增的多态性条带清晰稳定可靠.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张玉星	河北农业大学园艺学院	105	1012	18.0	26.0
2	陈世昌	河南农业职业学院植物科学系	27	212	7.0	13.0
3	孙文英	河南农业职业学院植物科学系	16	56	3.0	7.0
4	刘荣宁	河南农业职业学院植物科学系	22	100	6.0	9.0