T20N点突变对水稻OsRacD蛋白GTP酶活性的影响

• 作者: 刘肖飞 梁卫红
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: OsRacD 点突变 原核表达和纯化 GTP酶活性
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 56-61
• 页数: 6页
• 分类号: Q789
• 语种: 中文

摘要

OsRacD是水稻小GTP结合蛋白Rho家族成员,其功能之一是作为"分子开关",通过控制花粉管的延伸生长,参与光敏核不育水稻光周期的育性转换.在序列同源性比对和蛋白保守结构域分析的基础上,采用重叠延伸PCR方法在水稻OsRacD基因的第一个高度保守的基序G1区引入T20N点突变,模拟GDP结合形式的OsRacD.进一步构建了与组氨酸标签融合的原核表达载体,原核表达和纯化了野生型和突变型OsRacD蛋白,并通过Western blot证实了融合蛋白表达和纯化的正确性.纯化蛋白的GTP酶活性检测结果显示,突变后的OsRacD蛋白GTP水解活性显著降低,提示OsRacD在T20N突变前后具有不同的生化特性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁卫红	河南师范大学生命科学学院	52	262	8.0	14.0
2	刘肖飞	河南师范大学生命科学学院	3	33	1.0	3.0