E2F-1基因反转录病毒载体的构建及其对人胃癌细胞MGC-803增殖的影响

• 作者: 李雷 王晓通 肖强 苑汐子 谢玉波 钱倩
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 胃肿瘤 反转录病毒科 基因表达 细胞增殖 基因,E2F-1 细胞,MGC-803
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 381-385
• 分类号: R735.2
• 字数: 4257字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2010.05.004

摘要

目的:通过构建人同源基因E2F-1反转录病毒表达载体,观察E2F-1过表达对胃癌细胞MGC-803增殖的影响.方法:应用基因重组技术将E2F-1基因克隆到反转录病毒载体pLXSN中,并将经酶切和RT-PCR检测正确的重组载体转染PA317包装细胞,收集病毒上清液感染胃癌细胞MGC-803.应用 RT-PCR和Western印迹法检测MGC-803/pLXSN-E2F-1细胞中E2F-1 mRNA和蛋白的表达情况.应用克隆形成实验和MTT法检测细胞的增殖情况.结果:经酶切和RT-PCR检测结果显示,成功构建E2F-1反转录病毒表达载体.与MGC-803和MGC-803/pLXSN组相比, MGC-803/pLXSN-E2F-1组E2F-1 mRNA和蛋白的表达明显上调(P<0.05).MGC-803/pLXSN-E2F-1组的克隆形成率为48%,明显低于MGC-803组的81%和MGC-803/pLXSN组的77%,差异有统计学意义(P<0.01).MGC-803/pLXSN-E2F-1组的细胞增殖率明显慢于MGC-803组和MGC-803/pLXSN组(P<0.01).结论:成功构建了E2F-1基因过表达的反转录病毒表达载体,并将其成功感染MGC-803细胞,E2F-1过表达可抑制MGC-803细胞的增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王晓通	广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科	26	101	6.0	8.0
2	李雷	广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科	27	95	6.0	7.0
3	钱倩	广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科	6	30	4.0	5.0
4	谢玉波	广西医科大学第一附属医院麻醉科	154	576	10.0	13.0
5	肖强	广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科	104	361	9.0	11.0
6	苑汐子	广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科	1	2	1.0	1.0