甲型流感病毒核蛋白基因的真核质粒的构建及其表达

• 作者: 何士勤 冯润 孙坚 杨北 王农荣
• 来源期刊: 江西医药
• 学科: 医学
• 关键词: 甲型流感病毒 核蛋白 真核载体
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 9-11
• 页数: 3页
• 分类号: R-33
• 字数: 2722字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-2238.2010.01.005

摘要

目的 构建甲型流感病毒A/PR/8/34(H1N1)核蛋白(nucleoprotein.NP)基因的真核表达载体,转染Hela细胞,并用甲型流感病毒检测试剂盒(Flu A Rapid Test Kit)检测其表达情况.方法 用特异引物从甲型流感病毒cDNA中采用PCR技术克隆出NP基因,将其插入到真核表达质粒pcDNA3.1(+).酶切、PCR、测序鉴定后,构建好的peDNA3.1(+)/NP用脂质体转染法转染到Hela细胞,通过甲型流感病毒检测试剂盒检测其蛋白表达.结果 克隆出一个核苷酸长度为1432bp的基因,和A/PR/8/34(H1N1)(GenBank/NCB,GI:8486129)有98%的同源性,转染Hela细胞后用甲型流感病毒检测试剂盒检测到24h、48h、72h细胞内外的蛋白表达.结论 成功构建甲型流感病A/PR/8/34(H1N1)核蛋白基因的真核表达质粒,为进一步研究理化因素对该基因的影响、基因的结构和功能打下良好的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙坚		55	507	13.0	19.0
2	王农荣		34	234	7.0	13.0
3	冯润		3	15	3.0	3.0
4	杨北		1	6	1.0	1.0
5	何士勤		15	219	9.0	14.0