A型流感病毒核蛋白原核表达载体的构建与表达

• 作者: 付庆 李雪莲 杜献堂 胡军 马一君
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: A型流感病毒 核蛋白 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 887-890
• 页数: 4页
• 分类号: R318
• 字数: 2584字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2007.05.025

摘要

目的:构建A型流感病毒核蛋白(NP)的原核表达质粒,分析其在大肠杆菌中的表达状况.方法:采用逆转录聚合酶链式反应技术从A型流感病毒基因组中扩增出编码核蛋白的基因片段,克隆至pGEM-T Easy载体,PCR筛选阳性克隆并测序.经酶切后将目的片段亚克隆至表达载体pGEX-4T-1,转化大肠杆菌BL2(CDE3),PCR和酶切鉴定转化菌落.将阳性菌落经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹分析目的蛋白的表达.结果:RT-PCR扩增出NP基因序列,将其亚克隆至表达载体pGEX-4T-1构建成重组表达质粒,并在BL2(CDE3)中表达了NP融合蛋白.结论:成功构建A型流感病毒NP的重组表达质粒,并在大肠杆菌中表达了NP融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李雪莲	河南中医学院基础医学院病原与免疫学科	3	21	2.0	3.0
2	马一君	河南中医学院基础医学院病原与免疫学科	11	28	3.0	4.0
3	杜献堂	郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室	14	47	3.0	6.0
4	胡军	郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室	27	122	7.0	10.0
5	付庆	郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室	17	79	5.0	8.0