SHP-2重组腺病毒的包装及对心肌细胞的感染

• 作者: 张丽景 张力 徐长庆 李全凤 李弘 王丽娜 王果元 王秀丽 田野 董红岩 金成艳
• 来源期刊: 哈尔滨医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: SHP-2 重组腺病毒 包装 心肌细胞
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 524-526
• 分类号: Q782
• 字数: 2579字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1905.2010.06.002

摘要

目的 采用HEK293细胞包装Ad-GFP-SHP-2和Ad-GFP-SHP-2-E76A并扩增Ad-GFP重组腺病毒并感染乳鼠心肌细胞.方法 纯化两种载体;Pac Ⅰ酶切线性化;线性化的载体转染入HEK293细胞进行包装;从病变的HEK293细胞分离重组腺病毒.利用重组的腺病毒感染乳鼠心肌细胞,并在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达.结景 Pac Ⅰ酶切后,琼脂糖凝胶上显示有4.5 kb的条带;转染线性化的重组腺病毒载体人HEK293细胞中,反复冻融HEK293,其上清中含有重组腺病毒,当感染乳鼠心肌细胞感染复数为100时,感染效率大于90%.结论 成功包装重组腺病毒,包装后的腺病毒可高效感染乳鼠心肌细胞.