FKBP12.6重组腺病毒载体的构建及其心肌细胞感染效率测定

• 作者: 伍卫 周淑娴 李德
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: FKBP12.6 腺病毒载体 心肌细胞
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 271-275
• 页数: 5页
• 分类号: R749.1
• 字数: 3611字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-3554.2006.03.008

摘要

[目的]构建携带FKBP12.6基因的重组腺病毒载体以研究FKBP12.6在心力衰竭时心室肌电重构中的作用.[方法]将平端化的FKBP12.6片段连接到穿梭质粒pAdTrack-CMV构建重组穿梭质粒pAdTraek/FKBP12.6,用Xho I单酶切进行鉴定.采用电穿孔法将线性化pAdTrack/FKBP12.6转化AdEasier-1细菌,产生重组腺病毒质粒pAdEasy-1/FKBP12.6.采用脂质体介导法用线性化pAdEasy-1/FKBP12.6转染293细胞,从病变的293细胞分离、纯化重组腺病毒Ad.FKBP12.6:采用PCR方法对其进行鉴定.用重组腺病毒感染乳鼠心肌细胞,在荧光显微镜下计算GFP阳性细胞百分率.[结果]在病变293细胞的冻融上清中含有重组腺病毒Ad.FKBP12.6,其滴度为1.5×1012pfu/mL.当感染复数(MOI)为75时,感染效率可达100%.[结论]成功构建了携带FKBP12.6基因的重组腺病毒载体;Ad.FKBP12.6可高效感染乳鼠心肌细胞.本研究为进一步探讨FKBP12.6在心力衰竭时心室肌电重构中的作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周淑娴	中山大学附属第二医院心内科	106	528	12.0	18.0
2	伍卫	中山大学附属第二医院心内科	128	624	12.0	17.0
3	李德	中山大学附属第二医院心内科	10	65	5.0	8.0