猪源抗菌肽Protegrin-1基因在大肠杆菌中的融合表达

• 作者: 凡复 刘建新 吴跃明
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 抗菌肽 Protegrin-1 融合表达
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1123-1128
• 分类号: S8
• 字数: 4462字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2010.06.014

摘要

为了使猪源抗菌肽Protegrin-1(PG-1)在原核表达载体中获得高效表达,在不改变PG-1氨基酸的基础上,根据大肠杆菌偏好密码子表,替换PG-1部分密码子,设计两段互补的引物,利用搭桥PCR技术扩增完整的PG-1成熟肽基因,重组至融合表达载体pGEX-4T-1中,构建成抗菌肽PG-1基因融合表达载体pGEX4T-PG-1,转化至大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)plyS中,筛选得到阳性克隆,并用1.0 mmol/L的IPTG进行诱导表达.SDS-PAGE电泳图谱显示在28 kD处有特异性的蛋白条带出现,经Western blot检测表明重组子已经成功地在大肠杆菌中表达了融合蛋白.纯化得到的GST-PG-1用凝血酶切割后,经用亲合层析得到分子量约为2 kD抗菌肽PG-1蛋白1.38 mg/L.对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)抑菌试验结果表明,重组抗菌肽PG-1具有明显的抑菌效果.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘建新	浙江大学动物科学学院奶业科学研究所	317	3872	30.0	45.0
2	吴跃明	浙江大学动物科学学院奶业科学研究所	75	1109	18.0	28.0
3	凡复	浙江大学动物科学学院奶业科学研究所	1	3	1.0	1.0