应用HTS-ELISA筛选方法制备抗黄曲霉毒素M1单抗

• 作者: 何娜 张立军 裴世春 陆梅生
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 医学
• 关键词: 黄曲霉毒素 M1 高通量酶联免疫法 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 页码范围: 1406-1411
• 分类号: R446.61
• 语种: 中文

摘要

[目的]确立基于高通量酶联免疫(HTS-ELISA)筛选方法制备高亲和力抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体的方法体系.[方法]采用AFM1-BSA(Aflatoxin M1-bovine serum albumin)免疫Balb/C小鼠,利用HTS-ELISA方法筛选分泌抗黄曲霉毒素M1单抗的杂交瘤细胞株,并分析抗体的特性.[结果]筛选到14株具有分泌高活性抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,纯化的最佳抗体的亲和力为5.5×10-10mol/L.与黄曲霉毒素M1及其结构类似物黄曲霉毒素M2、B1、B2、G1、G2以及其他物质脱氧雪腐镰刀菌烯醇和BSA的交叉反应率分别为100%、4.5%、21.5%、1.0%、16.6%、1.0%、0%、0%.间接竞争ELISA检测最低检测限可达0.01μg/L,线性范围为0.1-10μg/L,竞争性抑制抗体反应50%的抑制浓度IC50为0.82μg/L,添加0.25-5 μg/L黄曲霉毒素的牛奶间接竞争ELISA检测回收率在60.3%-152.8%之间.[结论]HTS-ELISA方法可以制备具有高亲和力的抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体,可为黄曲霉毒素M1免疫检测体系的建立提供优质抗体材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陆梅生		2	6	2.0	2.0
2	裴世春	齐齐哈尔大学食品与生物工程学院	11	77	5.0	8.0
3	何娜	黑龙江八一农垦大学食品学院	3	12	3.0	3.0
4	张立军		1	4	1.0	1.0