大黄鱼鳍细胞系的建立及久效磷对其毒性作用的研究

• 作者: 姜国建 孙爱 徐晓辉 杨秀霞 樊廷俊 郭雪阳
• 来源期刊: 中国海洋大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 大黄鱼 鳍细胞 细胞系 久效磷 毒性作用
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 页码范围: 64-70
• 分类号: Q813.1+1
• 字数: 6611字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5174.2010.12.010

摘要

为了建市大黄鱼(Pseudosciaena crocea)鳍细胞系,为其细胞毒理学、病毒学与细胞工程等研究奠定基础,本文采用酶消化法使用含有20%胎牛血清(FBS)的DMEM/F12、Leibovitz L-15和DMEM培养液(pH7.2)在22～28℃分别启动了大黄鱼鳍组织的体外培养,通过添加促细胞贴壁和分裂的物质在最适堵养条件下对大黄鱼鳍细胞进行了原代培养和继代培养,并研究了久效磷对大黄鱼细胞系鳍细胞的毒性作用.体外培养结果显示,大黄鱼鳍细胞的最适培养液为20%FBS-DMEM/F12,最适培养温度为25℃,体外培养鳍细胞的形态主要为成纤维细胞样,22 d后便可形成汇合细胞单层,经过连续继代培养成功建立了大黄鱼的连续性鳍细胞系,目前已传至第112代;对第60代大黄鱼鳍细胞系细胞的鉴定结果显示,其群体倍增时间为50.96 h,分裂状态十分旺盛,虽然出现了染色体的非整倍性,但其特征性染色体数目仍为48条,并具有正常的6m+6sm+36t二倍体核型,证明所建立的细胞系确为大黄鱼鳍细胞系.不同浓度久效磷处理的检测结果显示,大黄鱼鳍细胞对久效磷敏感,20～160 μg/mL久效磷可引起鳍细胞乙酰胆碱酯酶活性的持续性显著降低,引起超氧化物歧化酶和谷胱甘肽-S-转移酶活性的显著升高并随着浓度的升高而逐渐降低,久效磷对该细胞系细胞的48 h半抑制浓度(IC50)为43.05 μg/mL,,证实久效磷对大黄鱼鳍细胞具有显著的毒性作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨秀霞	中国海洋大学海洋生命学院海洋生物系	17	146	8.0	12.0
2	樊廷俊	中国海洋大学海洋生命学院海洋生物系	55	543	13.0	21.0
3	孙爱	中国海洋大学海洋生命学院海洋生物系	5	47	3.0	5.0
4	徐晓辉	中国海洋大学海洋生命学院海洋生物系	5	48	3.0	5.0
5	姜国建	中国海洋大学海洋生命学院海洋生物系	16	199	10.0	14.0
6	郭雪阳	中国海洋大学海洋生命学院海洋生物系	3	25	3.0	3.0