同步化处理后小鼠成纤维细胞表观遗传水平的相对定量分析

• 作者: 季维智 王喜宏 纪少珲 金立方
• 来源期刊: 江西农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 小鼠胎儿成纤维细胞 同步化处理 组蛋白 甲基化 乙酰化
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 生物技术与工程
• 页码范围: 350-355
• 分类号: Q954.4
• 字数: 4764字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2286.2010.02.030

摘要

供体细胞的同步化处理可能改变其表观遗传特性,进而影响胚胎的克隆效率.研究同步化处理对小鼠胎儿成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts, MEFs)组蛋白H3K9甲基化、乙酰化及组蛋白H3K4单甲基化、三甲基化表达的影响.分离培养MEFs,增殖稳定的第3代MEFs分别用5 mL/L血清饥饿处理4 d或15 mL/L DMSO处理2 d使细胞处于增殖抑制期,通过免疫组化染色和Image-J图像处理软件,相对定量比较不同处理情况下组蛋白H3K9甲基化、乙酰化和组蛋白H3K4单甲基化、三甲基化变化情况.Ki-67染色检测结果表明,两种同步化处理可使细胞处于G0期或G1期.DMSO处理使MEFs组蛋白H3K9乙酰化表达水平升高,而5 mL/L血清饥饿处理则使其表达水平下降;此外,两种同步化处理均导致组蛋白H3K9甲基化和H3K4单甲基化表达下降,但不影响组蛋白H3K4三甲基化的表达水平. 研究结论表明:同步化处理可改变MEFs组蛋白乙酰化和甲基化表达水平,进而有可能影响胚胎克隆效率.