实时荧光定量PCR检测淋巴细胞中NKG2D、穿孔素和颗粒酶B基因的表达

• 作者: 李涛 李霞 杨举伦 王力 艾瑾 赵稳兴
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 实时荧光定量PCR 细胞免疫 NKG2D 穿孔素 颗粒酶B
• 年，卷（期）: 2010,（11）
• 页码范围: 1108-1110
• 分类号: R392.12
• 语种: 中文

摘要

目的:建立可用于测定淋巴细胞免疫功能的SYBRGreen Ⅰ实时荧光定量PCR技术.方法:根据NCBI基因库中4种基因(NKG2D、穿孔素、颗粒酶B和内参照GAPDH)的序列,设计合成相应的引物,扩增上述基因.建立SYBRGreen Ⅰ实时荧光定量PCR方法,检测肿瘤患者外周血淋巴细胞和诱导培养的患者CIK细胞(cytokine induced killer,CIK)中NKG2D、穿孔素和颗粒酶B mRNA的含量.结果:应用设计的引物扩增NKG2D、穿孔素和颗粒酶B基因后,经琼脂糖凝胶电泳和溶解曲线分析表明具有特异性.SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测结果表明,肿瘤患者的淋巴细胞中颗粒酶B基因的表达降低,而经细胞因子和单克隆抗体诱导培养的肿瘤患者CIK细胞与其淋巴细胞相比,细胞中穿孔素和颗粒酶B基因的表达明显增加(P＜0.01).结论:该SYBRGreen Ⅰ实时荧光定量PCR方法可用于检测淋巴细胞中NKG2D、穿孔素和颗粒酶B的mRNA的表达、作为研究淋巴细胞免疫功能的有力手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李涛	成都军区昆明总医院病理科	53	202	9.0	11.0
2	杨举伦	成都军区昆明总医院病理科	92	515	12.0	16.0
3	赵稳兴	成都军区昆明总医院病理科	39	196	7.0	12.0
4	王力	成都军区昆明总医院病理科	56	193	8.0	9.0
5	李霞	成都军区昆明总医院病理科	51	119	5.0	8.0
6	艾瑾	成都军区昆明总医院病理科	3	20	2.0	3.0