猪瘟病毒野毒株与疫苗株双重SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立

• 作者: 李曦 李海忠 李雪松 王伟 符芳 陈欣
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR 猪瘟病毒野毒株 C株
• 年，卷（期）: 2010,（11）
• 页码范围: 854-857
• 分类号: S852.65
• 字数: 2852字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2010.11.06

摘要

为建立猪瘟病毒(CSFV)兔化弱毒疫苗(C株)与野毒株的快速鉴别检测方法,本研究根据GenBank登录的CSFV C株与野毒株的E2基因序列差异,设计2对特异性引物,建立了同时检测C株与野毒株的双重SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法.应用该方法对CSFV野毒和疫苗株的最低检出量为10拷贝;检测牛病毒性腹泻病毒Ⅰ型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒和猪圆环病毒2型4种病毒均呈阴性;批内、批闻重复试验的变异系数均低于3%.应用该方法检测从黑龙江省各地区猪场采集的600份样品,结果表明野毒株的阳性率为30.5%.该方法可应用于CSFV野毒株和C株的鉴别检测.