肺炎衣原体0308基因真核表达载体构建及表达检测

• 作者: 刘雪晴 田颖新 程健君 贾天军 贾晓晖
• 来源期刊: 北京医学
• 学科: 医学
• 关键词: 肺炎衣原体 真核表达 间接免疫荧光技术 DNA疫苗
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 页码范围: 975-978
• 分类号: R5
• 字数: 2533字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建肺炎衣原体AR39株Cpn0308基因真核表达重组质粒,体外转染HeLa细胞并检测表达情况,为Cpn核酸疫苗的研制做准备.方法 应用PCR技术从CpnAR39株基因组中扩增Cpn0308全长基因,重组入pcDNA3.1/His A真核表达载体相应位点,进行酶切鉴定和序列分析后,运用脂质体介导重组质粒转染HeLa细胞,间接免疫荧光技术检测目的蛋白在真核细胞中表达情况.结果 PCR扩增得到393 bp的特异性Cpn0308基因,筛选鉴定出pcDNA3.1/His A-Cpn0308真核表达重组体,序列测定证实与GeneBank登录的CpnAR39株Cpn0308基因一致;间接免疫荧光法检测到重组质粒转染的HeLa细胞能够表达目的蛋白.结论 成功构建pcDNA3.1/HisA-Cpn0308真核表达重组体,且该重组体能够在体外真核细胞中表达目的蛋白,为进一步研究Cpn DNA疫苗以及研究该蛋白的生物学功能提供实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贾天军	河北北方学院病原生物学和免疫学研究所	100	295	7.0	14.0
2	程健君	河北北方学院病原生物学和免疫学研究所	21	100	6.0	9.0
3	刘雪晴	河北北方学院病原生物学和免疫学研究所	16	25	3.0	4.0
4	贾晓晖	河北北方学院病原生物学和免疫学研究所	31	57	5.0	6.0
5	田颖新	河北北方学院病原生物学和免疫学研究所	5	3	1.0	1.0