检测兔出血症病毒抗体间接ELISA方法的建立

• 作者: 任雪枫 何孔旺 徐为中 李超美 王芳 胡波 范志宇 蔡少平
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 兔出血症病毒 VP60 间接ELISA
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医·水产养殖
• 页码范围: 546-550
• 分类号: S858.291.24
• 字数: 3999字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2010.03.019

摘要

为建立检测兔出血症病毒(RHDV)抗体的间接ELISA方法,应用杆状病毒表达系统表达的RHDV VP60包被酶标板,经间接ELISA的最佳反应条件优化试验确定:抗原的包被浓度为4.62 μg/ml,标准阴、阳性血清稀释度为1 :200,封闭液选用2%明胶;羊抗兔IgG最佳稀释度为1 :4 000.阻断试验、特异性试验、敏感性试验、重复性试验结果显示,该方法具有较高的特异性、敏感性和重复性.用建立的ELISA方法与血凝抑制试验对临床血清样品进行检测,结果显示,ELISA与HI检测兔血清的RHDV抗体阳性率分别为84.7%(955/1 127)和76.0%(857/1 127),符合率为91.3%.该方法的建立为检测RHDV抗体提供了一种安全、特异、敏感、快速、操作简便经济的检测方法,为兔出血症免疫监测和预防控制提供了科学的技术手段.